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濾紙酶可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒酶液提?。?/p>

1. 組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g，加入1mL蒸餾水）加入蒸餾水，冰浴勻漿后于4℃，12000rpm離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：蒸餾水體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后4℃，12000rpm離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。

3. 培養(yǎng)液或其它液體：直接檢測(cè)。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、研缽、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

試劑組成和配制

試劑一：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑二：液體40mL×1瓶，4℃保存。

濾紙條：50mg×50條。

測(cè)定原理

濾紙酶水解濾紙產(chǎn)生的還原糖能與3,5-二**水楊酸生成紅棕色氨基化合物，在540nm處有最大光吸收，在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液顏色深淺與還原糖的量成正比，可測(cè)定計(jì)算得濾紙酶的活力。

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